Bagong Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flumineralscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Bagong Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit(Fluorescent RT-PCR Probe Method)

【Packaging specifications 】25 Mga Pagsusulit/Kit

【Intended usedad】

Ang kit na ito ay ginagamit para sa qualitative detection ng nucleic acid mula sa bagong coronavirus sa nasopharyngeal swabs, oropharyngeal (throat) swabs, anterior nasal swabs, mid-turbinate swabs, nasal wash at nasal aspirates mula sa mga indibidwal na pinaghihinalaang may COVID19 ng kanilang healthcare provider. Ang pagtuklas ng ORF1ab at N genes ng bagong coronavirus ay maaaring gamitin para sa pantulong na pagsusuri at epidemiological na pagsubaybay ng bagong impeksyon sa coronavirus.

【Principles of the procedure 】

Idinisenyo ang kit na ito para sa mga partikular na TaqMan probe at mga partikular na primer na idinisenyo para sa novel coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab at N gene sequence. Ang PCR reaction solution ay naglalaman ng 3 set ng mga partikular na primer at fluorescent probe para sa partikular na pagtuklas ng mga target, at isang karagdagang hanay ng mga partikular na primer at fluorescent probe ang ginagamit bilang panloob na standard na kontrol ng kit para sa pag-detect ng endogenous housekeeping genes.

Ang prinsipyo ng pagsubok ay ang tiyak na fluorescent probe ay natutunaw at nagpapasama sa aktibidad ng exonuclease ng Taq enzyme sa reaksyon ng PCR, upang ang reporter fluorescent group at ang quenched fluorescent group ay magkahiwalay, upang ang fluorescence monitoring system ay makatanggap ng fluorescent signal, at pagkatapos ay Sa pamamagitan ng enrichment effect ng PCR amplification, ang fluorescence signal ng probe ay umabot sa isang set threshold value-Ct value (Cycle threshold). Sa kaso ng walang target na amplicon, ang reporter group ng probe ay malapit sa quenching group. Sa oras na ito, nangyayari ang paglipat ng enerhiya ng fluorescence resonance, at ang fluorescence ng reporter group ay pinapatay ng quenching group, upang ang fluorescent signal ay hindi matukoy ng fluorescent PCR instrument.

Upang masubaybayan ang paggamit ng mga reagents sa panahon ng pagsubok, ang kit ay nilagyan ng positibo at negatibong mga kontrol: ang positibong kontrol ay naglalaman ng target na site na recombinant plasmid, at ang negatibong kontrol ay Distilled water, na ginagamit upang subaybayan ang polusyon sa kapaligiran. Inirerekomenda na magtakda ng positibong kontrol at negatibong kontrol nang sabay-sabay kapag sumusubok.

【Main components 】

Tandaan：( 1) Ang mga bahagi sa iba't ibang batch kit ay hindi maaaring ihalo o palitan.

(2) Maghanda ng sarili mong reagent: Nucleic acid extraction kit.

【Storage conditions at expiration date 】

For BST-SARS-25:Magdala at mag-imbak sa -20±5℃ sa mahabang panahon.

For BST-SARS-DR-25:Transport sa temperatura ng kuwarto. Mag-imbak sa -20±5 ℃ nang mahabang panahon.

Iwasan ang paulit-ulit na freeze-thaw cycle. Ang panahon ng bisa ay pansamantalang itinakda para sa 12 buwan.

Tingnan ang label para sa petsa ng paggawa at paggamit.

Pagkatapos ng unang pagbubukas, ang reagent ay maaaring maimbak sa -20±5 ° C nang hindi hihigit sa 1 buwan o hanggang sa katapusan ng panahon ng reagent, alinman ang petsa ang mauna, upang maiwasan ang paulit-ulit na freeze-thaw cycle, at ang bilang ng reagent freeze -Ang mga siklo ng pagtunaw ay hindi dapat lumampas sa 6 na beses.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Naaangkop na uri ng sample: Extracted nucleic acid solution.

2. Sample na imbakan at transportasyon: Mag-imbak sa-20±5℃ sa loob ng 6 na buwan. I-freeze at lasawin ang mga sample nang hindi hihigit sa 6 na beses.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Pumili ng angkop na kit ng pagkuha ng nucleic acid upang kunin ang viral nucleic acid, at sundin ang kaukulang mga tagubilin sa kit. Inirerekomendang gumamit ng Nucleic acid extraction at purification kit na ginawa ng Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. o katumbas na nucleic acid purification kit.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

( 1) Alisin ang SARS-Cov-2 Mix at Enzyme Mix , ganap na matunaw sa temperatura ng silid na ihalo nang lubusan sa pamamagitan ng Vortex device at pagkatapos ay i-centrifuge saglit.

(2) Ang 16.5uL Enzyme Mix ay idinagdag sa 358.5uL SARS-Cov-2 Mix at pinaghalo nang maigi upang makuha ang pinaghalong solusyon sa reaksyon.

(3) Maghanda ng malinis na 0.2 mL PCR octal tube at markahan ito ng 15uL ng nasa itaas na mixed reaction solution sa bawat balon.

(4) Magdagdag ng 15 μL ng purified nucleic acid solution, ang positibong kontrol at ang negatibong kontrol, at maingat na takpan ang octal tube cap.

(5) Haluing mabuti sa pamamagitan ng pagbaligtad, at mabilis na i-centrifuge upang mai-concentrate ang likido sa ilalim ng tubo.

1